Questo stack serie storica mostra un ameba (Dictyostelium discoideum) cercando molto difficile ingerire una cellula di lievito (Saccharomyces cerevisiae) che è leggermente troppo grande. (La cellula di lievito è un mutante con una gemma allungata Vedi nota 1.) L'ameba è espressione di due proteine di fusione fluorescenti: GFP-PLCdelta2 (nota 2), che si lega al fosfatidilinositolo 4,5-bisphophate etichette e la membrana plasmatica, e MRFP-LimEdelta (nota 3), che etichette filamenti di actina. Filamenti di actina forma la coppa fagocitica al suo bordo d'attacco e suonare in gruppi dinamici in quanto estende in profondità nella cella. Il lievito è troppo lungo, e alla fine l'ameba si arrende, come indicato dalla scomparsa dei filamenti di actina. Il lievito viene prontamente espulso con notevole velocità e forza, e la membrana in eccesso viene convertita in volant. I contatti ameba motili il lievito di nuovo, si estende lungo la sua lunghezza fino a raggiungere la fine, poi prova ancora a inghiottire, ma senza fortuna migliore. Le somiglianze tra una cella di diffusione su un sostrato e formare una coppa fagocitica sono evidenti. Metodi: Le cellule viventi sono stati ripresi utilizzando un microscopio a scansione laser 510 confocale Zeiss LSM con componenti standard e una Zeiss Plan-Apochromat 63x obiettivo 1.4 NA DIC. Immagini simultanee fluorescenza (confocale) e immagini DIC sono state registrate da un unico piano focale. Le scansioni sono state eseguite ogni 3,89 secondi utilizzando uno zoom scansione di 3.5. I riferimenti a reagenti: 1: S. cerevisiae DDY-1306 (.. Kozminski, KG, Chen, AJ, Rodal, AA, Drubin, DG Mol Cell Biol 11: 339-54, 2000). 2: proteina fluorescente verde fusa al dominio di omologia pleckstrin della fosfolipasi C delta-1 (Sauffer, TP, Ahn, S., e Meyer, T., Curr Biol 8:.. 343-346, 1998). 3: monomerico Red Fluorescent Protein fuso ad un frammento di Dictyostelium calce (Fischer, M., Haase, I., Simmeth, E., Gerisch, G., e Muller-Taubenberger, A., FEBS Lett 577:. 227-232 , 2004). Il video ha ricevuto una menzione d'onore nel concorso Olympus Imaging Bioscapes International Digital 2009 e può essere vista qui: http://www.olympusbioscapes.com/gallery/2009/. Una versione cinematografica di questo stack è disponibile in questa biblioteca a CIL: 12654. Processo biologico: ingestione, egestion, Digestione, risposta al cibo Autore: Margaret Clarke
