Un film di fagocitosi dei batteri da amebe Dictyostelium discoideum. Queste cellule di Dictyostelium esprimono GFP-2FYVE, che si lega alla fosfatidilinositolo 3-fosfato [PI (3) P], e MRFP-LimEdelta, che si lega ai filamenti di actina. I batteri sono E. coli che erano stati incubati con un inibitore della citocinesi, producendo forme allungate. Fosfoinositidi contribuiscono a conferire identità specifiche per comparto lungo il percorso endocytic. PI (3) P identifica endosomi precoci. Si associa con phagosomes ~ 1 minuto dopo l'assorbimento e persiste come avviene l'acidificazione e inizia la digestione. Si noti che le lunghe batteri non vincolano il PI verde (3) indicatore P fino a dopo che sono stati pienamente internalizzati. La morfologia modifica delle lunghe batteri all'interno dei fagosomi etichettati rivela l'azione degli enzimi digestivi. Tre serie temporali successive di 100 fotogrammi sono stati raccolti in un unico piano focale utilizzando un microscopio confocale Zeiss LSM510 con un DIC lente obiettivo 63x. I telai sono separati da 3,94 secondi. C'era uno spazio di 6 secondi tra le prime due serie tempo e uno spazio di 9 secondi tra la seconda e la terza serie temporali. La scala (dimensione del pixel) era 0,10 x 0,10 micron. Le immagini sono state esportate come TIF utilizzando Zeiss LSM 5 Examiner Immagine e salvati sia come una pila TIF (disponibile presso CIL: 7653) e come filmato AVI utilizzando NIH ImageJ. Il film si estende su 20 minuti; gioca a 7.5 fps, 30 volte la velocità effettiva. Per gli esperimenti correlati e ulteriori dettagli, vedere Clarke et al., PLoS ONE 5, e8585 (2010). Processo biologico: digestione, la risposta cellulare al cibo, ingestione Autore: Lucinda Maddera
