Un film che mostra l'acidificazione phagosome e neutralizzazione visualizzato per mezzo di FITC-lievito. Amebe di Dictyostelium discoideum sono stati alimentati vivono in erba lievito (S. cerevisiae ceppo TH2-1B) che era stata marcata con isotiocianato di fluoresceina (FITC, 0,25 mg / ml). Il amebe in tampone fosfato (pH 6,4) sono stati esaminati 1? ore più tardi utilizzando un microscopio a scansione laser confocale Zeiss LSM510; fotogrammi sono stati raccolti in un unico piano focale a intervalli di 5 secondi. Il lievito fluorescenza brillantemente nel mezzo extracellulare, ma sono debole in phagosomes acide perché FITC fluorescenza si spegne a pH acido. Alla fine del percorso endocitica, phagosomes vengono neutralizzati e il lievito carcassa indigeribile è exocytosed. Questa serie temporale mostra fluttuazioni di intensità di fluorescenza appena prima di esocitosi di un lievito. Che il lievito è prontamente fagocitato da un'altra cella, e il lievito cresce dim come phagosome viene acidificato. Nel frattempo, un secondo lievito nella stessa cella cresce più luminoso, presumibilmente in preparazione per esocitosi. Il amebe sono anche esprimendo altri due marcatori fluorescenti, che sono debolmente visibili, MRFP-lime-delta, che etichette filamenti di actina, e VATM-GFP, una subunità del V-ATPasi. Trecento fotogrammi della serie temporale sono stati esportati come tif immagini e salvate come una pila in ImageJ (e disponibile al CIL: 7625); sono mostrati qui come un filmato (AVI) a 10 fps. Per gli esperimenti correlati e ulteriori dettagli, vedere Clarke et al, PLoS ONE 5:. E8585 (2010). Processo biologico: digestione, risposta al cibo Autore: Lucinda Maddera
