Canis lupus familiaris (cellule epiteliali del rene) - CIL:44510
Ora le immagini di microscopia luce serie che illustrano una guarigione della ferita test. Un monostrato di MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cellule epiteliali è graffiato per creare un 'ferite' circa 300 micrometri di larghezza, dopo di che la crescita delle cellule per riempire la ferita è monitorato registrando immagini nel corso di 15h. Questa immagine è parte di un gruppo di 12 che comprende cellule di controllo (CIL: 44501, 502, 506, 507, 508) e dopo l'aggiunta di Hepatocyte Growth Factor / Scatter Factor (HGF / SF) per attivare HGF / SF-Met segnalazione (CIL: 44503, 504, 505, 509, 510). Anche nel gruppo sono due film, uno di controllo (CIL: 44.511), e una HGF / SF trattati (CIL: 44512). Per ferita ulteriore test di guarigione vedono CIL: 43401 e le immagini raggruppate con essa. Processo biologico: la guarigione della ferita, la diffusione delle cellule epidermiche, la migrazione delle cellule Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) cellule epiteliali che esprimono YFP-membrana sono stati mantenuti in DMEM supplementato con 5% FCS fetali in un 37? C, 5% incubatore CO2. Ferita dosaggio guarigione: Le cellule sono state coltivate a 90% di confluenza in piastre da 24 pozzetti. Prima di graffi, le cellule sono state lasciate morire cambiando medio DMEM più 0,1% FCS (media inedia) per 24 ore. Il mezzo è stato poi cambiato a uno mezzo fresco inedia (controllo), o media inedia con 80 ng ml-1 HGF / SF per altre 2 ore. Un graffio di circa 300 micron di larghezza è stata generata con una punta di 200 microlitri. La piastra è stata sottoposta alla microscopia lasso di tempo in un incubatore fase (OKOLAB, Italia) su un palco motorizzato controllato dal computer di un microscopio confocale (CLSM-510, Carl Zeiss, Germania), utilizzato in modalità DIC non confocale, con un 10x (NA 0.30) obiettivo. Acquisizione di immagini è stato avviato due ore tiragraffi. Le immagini sono state acquisite ogni 15,7 minuti per 15 ore. Le coordinate di ogni graffi sono stati predefiniti, e una macro che posiziona ripetutamente il campo di vista in ogni punto è stato eseguito. Il acquisita contrasto interferenziale differenziale (DIC) canale della sequenza temporizzata è stato utilizzato per l'analisi. Autore: Doron Kaplan Fonte The Cell: una libreria di immagini
