Dies ist IMAGE #5 (Stunde 6) eines sich entwickelnden Neurons aus dem Optiktektum eines Albino Xenopus laevis tadpole CNS, Stadium 47. Die Zelle wurde täglich über 3 Tage aufgenommen und zeigt die Entwicklung des dendritischen Baumes und des Axons im Laufe der Zeit. Dies ist ein zweites Bild dieser Zelle zu diesem Zeitpunkt. Die Zelle wurde mit in vivo Elektroporation der Plasmid-DNA transfiziert, die eGFP codiert, ~24 Stunden bevor das Bild aufgenommen wurde. Die intakte, lebende Kaulquappe wurde betäubt, unter einem Glasdeckzettel positioniert und dieses Bild mit einem eigens angefertigten Zwei-Photonen-Mikroskop direkt durch die transparente Haut hindurch aufgenommen. Biologischer Prozess: Neuronentwicklung, Morphogenese einer Verzweigungsstruktur Die Spezifikationen des kundenspezifischen Zwei-Photonen-Mikroskops, einschließlich der Laserquellen, Signalverstärkung, PMT-Spezifikationen und YFP-Filter sind in: Ruthazer ES, Li J, Cline HT beschrieben. 2006. Stabilisierung der Dynamik des Axonzweigs durch synaptische Reifung. J Neurosci 26 (13): 3594-3603. Die Methoden der Zelltransfektion mit Elektroporation finden Sie hier: Bestman JE, Ewald RC, Chiu S-L, Cline HT. 2006. In-vivo Einzelzellelektroporation zur Übertragung von DNA und Makromolekülen. Nat Protokolle 1 (3): 1267-1272. Weitere Erklärungen finden Sie hier: Bestman JE, Cline HT. 2008. Das RNA-Bindungsprotein CPEB reguliert die Dendrit-Morphogenese und die neuronale Schaltkreisbildung in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A 105 (51): 20494-20499. Bestman JE, Cline HT. 2009. Die Beziehung zwischen Dendritic Branch Dynamics und CPEB-markierten RNP-Granulaten in Vivo. Neuronale Schaltkreise vorne 3:10. Autor: Holly Cline
Quelle: The Cell: An Image Library
