Dies ist BILD #4 (30 Minuten) einer Zeitreihe, die in dieser Bildgruppe enthalten ist. Es zeigt Neuronen aus dem Optiktektum eines Albino Xenopus laevis tadpole CNS, Stadium 47. Die Bilder wurden mit ca. 10-Minuten-Intervallen aufgenommen und zeigen die morphologische Plastizität des dendritischen Dorns mit Zweigzu- und -abzügen. Diese Zellen wurden ~24 Stunden früher mit in vivo Elektroporation der Plasmid-DNA transfiziert, die eYFP kodiert. Die intakte, lebende Kaulquappe wurde betäubt, unter einem Glasdeckzettel positioniert und dieses Bild mit einem eigens angefertigten Zwei-Photonen-Mikroskop direkt durch die transparente Haut hindurch aufgenommen. Die Bilder wurden in 0,10,20,30,30 und 50 Minuten aufgenommen. Nach 60 Minuten wurde das Tier für ca. 4 Stunden in eine 50 microMolar Anisomycin-Lösung gegeben. Anschließend wurde eine zweite Zeitreihe (10-Minuten-Intervall für 60 Minuten) aufgenommen. Biologischer Prozess: Neuronentwicklung, Morphogenese einer Verzweigungsstruktur Die Spezifikationen des kundenspezifischen Zwei-Photonen-Mikroskops, einschließlich der Laserquellen, Signalverstärkung, PMT-Spezifikationen und YFP-Filter sind in: Ruthazer ES, Li J, Cline HT beschrieben. 2006. Stabilisierung der Dynamik des Axonzweigs durch synaptische Reifung. J Neurosci 26 (13): 3594-3603. Die Methoden der Zelltransfektion mit Elektroporation finden Sie hier: Bestman JE, Ewald RC, Chiu S-L, Cline HT. 2006. In-vivo Einzelzellelektroporation zur Übertragung von DNA und Makromolekülen. Nat Protokolle 1 (3): 1267-1272. Weitere Erklärungen finden Sie hier: Bestman JE, Cline HT. 2008. Das RNA-Bindungsprotein CPEB reguliert die Dendrit-Morphogenese und die neuronale Schaltkreisbildung in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A 105 (51): 20494-20499. Bestman JE, Cline HT. 2009. Die Beziehung zwischen Dendritic Branch Dynamics und CPEB-markierten RNP-Granulaten in Vivo. Neuronale Schaltkreise vorne 3:10. Autor: Holly Cline
Quelle: The Cell: An Image Library