Dies ist BILD #7 (Zeitpunkt: 8 Stunden, schneller Zeitablauf) einer Bildgruppe. Es zeigt ein Neuron aus dem Optiktektum eines Albino Xenopus laevis tadpole CNS, Stadium 47. Diese Zeitreihe erfasst alle 60 Sekunden für 10 Minuten den dendritischen Baum dieses Neurons. Im Laufe der Zeit driftet die Kaulquappe (und das Neuron) über das Feld. In der Serie wurden z-Stapel dieses Neurons im Abstand von 2 Stunden für 8 Stunden aufgenommen. Anschließend wurde eine zweite Zeitreihe im 60-Sekunden-Intervall für 10 Minuten aufgenommen. Diese Zeitreihe zeigt die dendritische Entwicklung des dendritischen Dorns und die morphologische Plastizität des dendritischen Dorns mit Zu- und Rückzügen. Die Zelle wurde mit in vivo Elektroporation der Plasmid-DNA transfiziert, die eGFP codiert, ~24 Stunden bevor das Bild aufgenommen wurde. Die intakte, lebende Kaulquappe wurde betäubt, unter einem Glasdeckzettel positioniert und dieses Bild mit einem eigens angefertigten Zwei-Photonen-Mikroskop direkt durch die transparente Haut hindurch aufgenommen. Biologischer Prozess: Neuronentwicklung, Morphogenese einer Verzweigungsstruktur Die Spezifikationen des kundenspezifischen Zwei-Photonen-Mikroskops, einschließlich der Laserquellen, Signalverstärkung, PMT-Spezifikationen und YFP-Filter sind in: Ruthazer ES, Li J, Cline HT beschrieben. 2006. Stabilisierung der Dynamik des Axonzweigs durch synaptische Reifung. J Neurosci 26 (13): 3594-3603. Die Methoden der Zelltransfektion mit Elektroporation finden Sie hier: Bestman JE, Ewald RC, Chiu S-L, Cline HT. 2006. In-vivo Einzelzellelektroporation zur Übertragung von DNA und Makromolekülen. Nat Protokolle 1 (3): 1267-1272. Weitere Erklärungen finden Sie hier: Bestman JE, Cline HT. 2008. Das RNA-Bindungsprotein CPEB reguliert die Dendrit-Morphogenese und die neuronale Schaltkreisbildung in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A 105 (51): 20494-20499. Bestman JE, Cline HT. 2009. Die Beziehung zwischen Dendritic Branch Dynamics und CPEB-markierten RNP-Granulaten in Vivo. Neuronale Schaltkreise vorne 3:10. Autor: Holly Cline
Quelle: The Cell: An Image Library